作者：翟夷 北京市朝陽區六里屯社區衛生服務中心(北京城建老年病醫院)

MTT檢測Ru（II）聚吡啶復合物對人宮頸癌HeLa細胞系的細胞毒性，并與順鉑的結果進行比較。本研究中測試的釕配合物的細胞毒性也可以通過半抑制濃度值進行比較。通過繪制細胞活力與配合物濃度的關系，計算出配合物對應的半抑制濃度值。這些結果中，我們可以得出結論，細胞活力隨著Ru（II）復合物濃度的增加而降低。配合物的半抑制濃度值均高于順鉑，說明在相同的條件下，復合物的細胞毒性活性低于順鉑。當比較半抑制濃度值時，復合物的細胞毒活性高于復合物。根據研究結果，我們推測該配合物的抗腫瘤活性可能與該配合物的特定分子形狀、配體的化學結構和性質有關。
目前使用的大多數細胞毒性抗癌藥物已被證明可誘導敏感細胞凋亡。不同的制劑與不同的目標相互作用，誘導細胞死亡，具有一些共同的特征（DNA的核內裂解，染色質凝結的變化），這一事實表明，細胞毒性是由細胞參與這種所謂的雙程序性^細胞死亡的能力決定的。Annexin V是一種重組磷脂酰絲氨酸結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸殘基特異性相互作用，可用于檢測細胞凋亡為確定Annexin V陽性（凋亡）細胞的百分比，用復合物處理HeLa細胞24 h后，用流式細胞術進行檢測。顯示了有無復合物時HeLa細胞的代表性直方圖。Annexin V陽性細胞的百分比（復雜142.02%，復雜223.09%，復雜317.2%，復雜3和38.3 %復雜4）顯著增加相比，未經處理的細胞（陰性對照），但當這些細胞與陽性對照（順鉑）相比，有一個明確的相關性這些復合物與順鉑的活動.所示這些結果證實了誘導的細胞死亡主要是通過細胞凋亡發生的。
采用流式細胞術檢測AO（吖啶橙）染色細胞24 h中合成的釕復合物對HeLa細胞細胞周期的影響。AO可以區分靜止細胞和激活的增殖細胞，也可以允許多個G1室的差異檢測。用復合物處理HeLa細胞的半抑制濃度值24 h后，細胞DNA分布。釕配合物處理后，G0/G1期細胞百分比從對照組的12.3 %分別增加到30.7、31.2、30.06和33.1 %。用釕配合物處理HeLa細胞后，G0/G1期細胞顯著增強，同時S期細胞百分比相應降低。這些結果表明，復合物誘導細胞周期阻滯在G0/G1期。
分子對接研究我們進行了詳細的分子對接，以進一步探索決定結合親和力的分子因素和釕配合物與人類DNA TOP1的結合能。拓撲異構酶已經被研究為產生新的癌癥治療方法的靶點，因為當它們在細胞中被抑制時，其結果是細胞死亡。因此，拓撲異構酶的抑制劑有能力殺死所有正在經歷DNA復制、讀取DNA以產生蛋白質或經歷DNA損傷修復的細胞。由于癌細胞分裂速度比正常細胞快得多，癌細胞會被拓撲異構酶抑制劑殺死，盡管一些具有拓撲異構酶活性的正常細胞也會被殺死。DNA TOP1在腫瘤細胞中過表達，是癌癥化療中的一個重要靶點。釕配合物被連接到TOP1的活性位點口袋中，在發現工作室中使用LibDock模塊。其中，復合物的dock得分最高，為144.097千卡/mol。DNA堿基對和蛋白質氨基酸的活性位點口袋殘基涉及與配合物的氫鍵形成。因此，這些殘基在底物結合中發揮著重要的作用，從而產生對釕配合物的代謝活性。釕配合物的氫鍵和Dock分數。得分越高，表明受體與配體的結合親和力越強。對接結果表明，受體-配體復合物通過氫鍵和疏水相互作用來穩定。
結論合成了釕聚吡啶配合物并進行了表征。DNA相互作用已通過光譜方法和粘度測量進行。綜上所述，釕聚吡啶配合物通過插入方式與DNA相互作用。所有合成的配合物都與BSA相互作用較強。通過分子對接模擬了四種釕配合物與DNA TOP1的相互作用，在基于結構的藥物設計中發揮了重要作用，這些結果表明合成的配合物與TOP1的核苷酸和氨基酸相互作用。在輻照條件下，釕配合物可以裂解pBR322的DNA，這表明單線態氧負責pBR322的DNA的裂解。抗菌和抗氧化活性分析表明，與其他復合物相比，復合物對所有測試微生物的活性都更高，而復合物的抗菌活性都是中等的，。合成的釕聚吡啶配合物對HeLa細胞均具有體外抗癌活性，表明復合物具有較高的細胞毒性。